바이오세상 DNA ladder

DNA 전기영동 필수 시약! DNA ladder !

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전기영동이란?

- 전기적인 힘을 이용하여 생체 고분자들(DNA, RNA, 단백질 등)을 gel 에서 이동 시켜 크기에 따라 분리하는 기술 입니다.

DNA 전기영동 원리

- DNA는 backbone의 phosphate group 때문에 전기영동에 사용되는 buffer 내 에서 음전하를 띄고 있습니다. 그렇기 때문에

두 전극 사이에 위치했을 때 양극(+)으로 움직이게 되는 기본 원리를 가지며, 이러한 원리를 통해 DNA를 크기별로 분리할 수 있습니다.

[그림 설명] (A) 위치에 주입한 DNA 시료(-)가 +극 방향(B)으로 이동하는 모습

전기영동 시 DNA 이동에 영향을 주는 요인

1)DNA 사이즈가 클수록 천천히 이동한다	2)Agarose 농도가 높을수록 천천히 이동한다
3)DNA 형태(구조)에 따라 이동속도가 다르다	4)부하되는 전압이 높을수록 이동속도가 빠르다

전기영동에 필요한 재료

1) Agarose gel

- Agarose gel 농도에 따라 분리 가능한 DNA 범위가 다르며, 농도가 높을 수록 더 작은 DNA 단편을 분리할 수 있습니다.

2) 전기영동 Buffer

- 전기장으로 인한 pH 변화를 줄이고 DNA 를 (+)극으로 이동시키기 위해 사용되는 완충용액 입니다.

3) DNA loading dye

- 눈에 보이지 않는 DNA를 gel 상에서 확인하기 위해 필수로 사용해야 하는 시약 입니다.

4) Staining dye (EtBr 대체제 Safe Shine Series 사용)

- DNA 를 염색하기 위해 사용되는 시약으로 UV에 노출되면 발광 된 band를 확인할 수 있습니다.

5) Size marker

DNA size marker는 전기영동을 하게 되는 샘플 DNA의 크기를 알기 위해 비교 목적으로 사용하는 DNA 입니다. 이미 크기를 알고 있는

DNA조각들을 marker로 이용하게 되는데, 샘플 DNA의 크기를 어느 정도 예측하여 적당한 size marker 를 선택하여 사용하면 됩니다.

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