Immunoprecipitation(IP): 면역침강법 알아보기
2024-02-13
•IP(Immunoprecipitation)란?
Immunoprecipitation(IP)은 현재 널리 사용되고 있는 면역화학적 기술 중 하나로써 항원과 항체의 친화성을 이용하여, 용액으로부터 항원을 특이적으로 분리하는
기술입니다. 이 기술을 통해 항원의 분자량 결정, 단백질 상호작용 연구, 특정 효소 활성 측정, 단백질 전사 후 변화 모니터링 등을 확인 할 수 있습니다.
•IP(Immunoprecipitation) 원리
우리가 원하는 특정 단백질 항원(Specific target antigen)에 대항하는 항체를 Cell Lysate와 같은 샘플 안에 넣어주어, 항원 항체 면역 복합체(Ag-Ab immune
complex)를 형성합니다. 이 면역 복합체를 Protein A 또는 Protein G 가 붙어 있는 고체 물질(Agarose bead or Magnetic bead)이 붙잡게 되고, 이를 침전 시킨 후
Bead 와 결합을 끊는 방법으로 원하는 표적 항원을 분리하여 얻을 수 있습니다.
•IP 실험 요약
•실험 목적에 따른 IP 종류
•IP 관련 제품
| Product | Cat.# | 제조사 | |
|
샘플 준비 |
RIPA buffer | RC2002-050-00 | 바이오세상 |
| RIPA buffer(10X) | 9806S | Cell Signaling Technology, Inc. | |
| Protease & Phosphatase Inhibitors | 5872S | Cell Signaling Technology, Inc. | |
|
항체 결합 |
1st Antibody for IP | ||
| BSA | AC1025-100-00 | 바이오세상 | |
| Nonfat Dry Milk | 9999S | Cell Signaling Technology, Inc. | |
|
침전 |
Protein A Agarose Beads | 9863S | Cell Signaling Technology, Inc. |
| Protein G Agarose Beads | 37478S | Cell Signaling Technology, Inc. | |
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Washing & Elution |
(T1016)TRIS | TR1016-100-00 |
바이오세상 |
| (T2016-7.4) 1M Tris-HCl, pH 7.4 500ML | TR2016-050-74 | ||
| (T1020)TRITON X-100(상온RT) | TR1020-500-00 | ||
| (S2007) 5M Sodium Chloride Solution | SR2007-050-00 | ||
| (E2002) 500mM EDTA, pH 8.0 500ML | ER2002-050-80 | ||
| (W2006) Water, Ultra pure (상온) 1L | WR2006-100-00 | ||
| (G2009-2.5)0.1M Glycine buffer, pH2.5 500ML | GR2009-050-25 | ||
|
분리 및 분석 |
SDS-PAGE | SE250 or SE260 |
Hoefer |
| Transfer | wet or semi-dry type | ||
