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[BIO-RAD] One-step vs Two-step RT-qPCR, 어떤 방법을 선택해야 할까?

2026-06-02
One-step vs Two-step RT-qPCR 대문 이미지
📙RT-qPCR(Reverse Transcription Quantitative PCR)이란?
  • RT-qPCR이란, RNA를 cDNA로 변환한 뒤, 실시간 형광 신호를 통해 target 유전자의 발현량을 정량적으로 분석하는 기술입니다.
  • qPCR workflow는 실험 목적과 분석 대상에 따라 One-step 또는 Two-step 방식으로 진행할 수 있습니다.
  • 각 방식은 실험 편의성, 실험 목적 측면에서 차이가 있으며, Bio-Rad는 각 워크플로우에 최적화된 토탈 솔루션을 제공합니다.
RT-qPCR workflow 이미지
📘One-step과 Two-step RT-qPCR의 차이

One-step RT-qPCR은 역전사(RT)와 qPCR을 하나의 튜브 및 단일 버퍼 시스템에서 연속적으로 수행하는 반면, Two-step RT-qPCR은 두 과정을 별도의 단계로 수행한다는 점이 가장 큰 차이입니다.

One-step Two-step RT-qPCR workflow 비교 이미지
One-step qPCR Two-step qPCR
장점 • 오염 위험성 최소화
• 간편한 워크플로우
• cDNA 보관 용이
• RT 조건 최적화 가능(RT primer 선택 가능)
• 하나의 샘플로 여러 번 분석 가능
한계 • RT 조건 최적화가 어려움(RT primer : Gene-Specific primers)
• cDNA 보관 어려움
• cDNA handling 과정 추가로 인한 오염 가능성 증가
• One-step 대비 Hands-on time 추가 소요
추천 대상 • High-throughput 샘플일 경우
• 다량의 RNA sample을 평가해야 하는 경우
• 소량의 RNA 샘플에서 다양한 target을 확인해야 하는 경우
• 향후 재사용을 위한 cDNA 보관이 필요한 경우
→ 일반적인 gene expression 실험을 하는 경우
                                   💡 실험 목적, 샘플 수, target 수, workflow에 따라 적절한 Bio-Rad qPCR 제품을 선택하는 것이 중요합니다.
✅ Quick Selection Guide
많은 샘플을 빠르게 분석하고 싶어요
One-step
다양한 gene을 분석하고 싶어요
Two-step
실험 시 오염 위험을 줄이고 싶어요
One-step
cDNA를 향후 재사용하고 싶어요
Two-step
Quick Selection Guide
📗Bio-Rad 대표 qPCR 제품
구분 품명 용량 품번 제품 사진 제품 설명
One step PCR iTaq Universal SYBR Green One-Step Kit 100 rxns 1725150 제품 사진 • One step PCR 실험을 위한 Bio-Rad 표준 SYBR Green 키트
• 구성 : 4 × 100 μL 5× RT Supermix, No-RT Control Supermix(50 reactions), Nuclease-free Water
Two step PCR iScript Reverse Transcription Supermix 400 µl 1708841 제품 사진 • Two-step RT-qPCR workflow의 첫 단계인 cDNA 합성을 위한 Reverse Transcription 시약
• 구성 : 4 x 100 µl 5x supermix
SsoAdvanced Universal SYBR Green Supermix 2 ml 1725270 제품 사진 • cDNA를 template로 사용하는 qPCR 단계용 SYBR Green Master Mix
• Bio-Rad의 특허받은 Sso7d Fusion Polymerase 기술이 적용되어 높은 증폭 효율과 우수한 재현성을 제공합니다.
• 구성 : 2 mL (2 × 1 mL vial)
해당 대표 제품 외에도, 실험자의 실험 목적에 맞춘 다양한 Bio-Rad qPCR 라인업이 준비되어 있습니다
대표전화 1670-5911
www.seoulin.co.kr / slb@seoulin.co.kr
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