Antibody 선택 가이드

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

• Antibody (= Immunoglobulin) 정의

– 면역계 내에서 항원의 자극에 의하여 만들어지는 물질로 항원과 특이적인 결합을 하여 항원–항체 반응을 일으키는 물질

– 2 heavy chain + 2 light chain 으로 구성된 Y 자형의 단백질

 

• Antibody 종류

1) 치료용 항체: Target에 붙어 항원의 활성 억제 또는 Degradation 시켜 항원이 기능을 못하게 하는 면역 항체

2) 분석용 항체: Target 에 붙기는 하지만 작용하는게 아니라 Target 의 특성이나 성질을 관찰하기 위해 사용

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

* 분석용 항체

① Reactivity: Antibody가 인식할 수 있는 Antigen site가 있는 종 (Species)

② Application: 항체를 사용해서 결과를 낼 수 있는 실험법

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

③ Clone: Monoclonal Antibody에만 있는 정보로 해당 Clone에서 Antibody를 생산

④ Clonality: Polyclonal Antibody/ Monoclonal Antibody

 

	Polyclonal Antibody	Monoclonal Antibody
정 의	여러 종류의 B 림프구에서 분비된 항원 결정기가 일정하지 않은 여러 종류의 항체	분자구조가 동일한 하나의 B 림프구에서 만들어진 한 종류의 항체 각기 다른 특성을 가진 항체를 생산할 수 있는 Hybridoma Cell에서 생성
Epitope 수	하나의 Target에 있는 여러 Epitope에 반응 (Antigen과 결합력이 높음)	하나의 Target에 있는 하나의 Epitope에 반응
목 적	발현성이 낮은 단백질을 Detect 할 때 사용	① 발현성이 높은 단백질을 Detect 할 때 사용 ② 정확한 Target Binding을 필요할 때 사용
Application	Western Blot, Immunoprecipitation (IP),  Chromatin Immunoprecipitation (ChIP),  Immunohistochemistry	단백질 구조 분석, 세포 신호 전달에서 사용

⑤ Host: 항체를 만들어낸 종(species)

※ Secondary antibody 선택 시 필요

 

⑥ Conjugate: 항체에 추가적으로 붙은 물질로 결과물을 눈으로(형광, 발색, 침전물 등) 확인하기 위해 사용

Ex) HRP, AP, Biotin, Fluorescence