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[FAQ] Hyclone Serum Heat inactivation은 꼭 해야하나요????

2021-07-21
Hyclone Serum (Fetal Bovine Serum, Bovine Calf Serum 등등) Heat inactivation은 꼭 해야할까요???

열 불활성화(Heat inactivation)는 1970년대 이전부터 시행된 방법으로 보체 불활성화 및 마이코플라스마 등 미생물 제거를 위해서 사용하기 시작하였습니다.
열 불활성화를 진행하는 연구자의 70% 정도는 단순히 실험 프로토콜에 포함되어 있기 때문이거나, 일반적으로 항상 필요하다고 생각되기에  열 불활성화를 진행합니다.
하지만 혈청 수집 및 처리 과정이 과거와는 달리 많은 부분 개선되었기 떄문에, 이 과정이 필요했던 주요 이유들은 대부분 사라졌습니다.

•보체 (Complement factors)
Triglia와 Linscott가 상업용 FBS에서 Conglutin, C3b같은 9개의 보체 성분을 분석한 결과에 따르면,
세포배양에 영향을 줄만큼 충분한 양이 제품에 포함되어 있지 않음을 보여줍니다.
보체종류 함유량
Conglutinin, C1, C6 성체 혈청 수준의 1~3%
C3 검출 불가
그 외 나머지 보체들 성체 혈청 수준의 5~50%
•마이코플라즈마(Mycoplasmas) 등 미생물 오염
초기 혈청 제품은 0.45um 사이즈 필터에 여과되어, 가끔 마이코플라즈마가 혈청이나 배지 제품에서 발견되는 경우가 있었습니다.
하지만 Hyclone의 혈청 제품은 0.1um 사이즈의 필터에 3번 연속 여과되어 생산하고 있기 때문에 열 불활성화가 굳이 필요하지 않습니다.

•Heat inactivation에 따른 영향
세포주 종류 열 불활성화 혈청의 영향
 HBAE, Human foreskin fibroblast, MDBK, MRC-5, Mv 1Lu, Vero 악영향 (성장 감소)
CHO-K1, FOX-NY hybrid, MDCK 영향 받지 않음
Balb/373, Sp2/0 Ag14 hybrid 약간 향상됨
•Heat inactivation 온도, 시간 변화에 따른 영향